Перенос in vivo β-галактозидазы с помощью амфифильных и комбинированных липосом

Авторы

  • Елена Валентиновна Богданенко Научно-исследовательский институт общей патологии и патофизиологии, Москва https://orcid.org/0000-0002-3351-3916
  • Ренад Ибрагимович Жданов Институт фундаментальной медицины и биологии, Приволжский федеральный университет, Казань; Институт перспективных исследований, Московский педагогический государственный университет, Москва

DOI:

https://doi.org/10.25557/0031-2991.2017.03.4-9

Ключевые слова:

мыши, производные олигоэтиленпропиленимина; лактозилированные липосомы; генный перенос; адресная доставка; воротная вена; гистохимическая реакция; холеним.

Аннотация

Цель исследования. Получение безопасного и эффективного вектора в целях генной терапии остается актуальной и нерешенной задачей, несмотря на усилия многих лабораторий в мире. Синтез веществ, имеющих сродство к ДНК и стабилизирующих ее спираль, а также обладающих группировками, опознаваемыми клетками нужных органов, является одним из перспективных направлений в таких исследованиях. Целью данной работы было изучение эффективности переноса в различные органы мышей репортерного гена бактериальной β-галактозидазы липосомами, содержащими синтетические холестериновые производные олигоэтиленпропиленимина (дихоленим и трихоленим), а также лактозилированный диглицерид (лактозолипид, LacS). Методика. Предварительно электронномикроскопически была подтверждена способность холенимов образовывать комплексы с ДНК оптимальных для трансфекции размеров (100-200 нм). Проверка холенимов на токсичность in vivo и реакцию на введение липосом (фосфатидилхолин(ФХ)/дихоленим, ФХ/трихоленим и ФХ/лактозолипид/дихоленим в комплексе с плазмидой pCMV-SPORT-β-gal) в воротную вену печени проводились на самцах мышей линии ICR массой 30-40 г. Контролем служили интактные животные. Результаты. Cпособность холенимов образовывать комплексы с ДНК была подтверждена электронными микрофотографиями. Размеры комплексов (100-200 нм) оказались оптимальными для трансфекции in vivo, а. холенимы – нетоксичными. Через 2 сут после введения комплексов гистохимически на криосрезах внутренних органов животных с Х-Gal (субстрат) и обнаружена отчетливо выраженная трансфекция органов, в том числе печени – главного объекта генной терапии. Заключение. Лактозилированный липид LacS и производные олигоэтиленпропиленимина холенимы являются безопасными не менее и эффективными для достижения экспрессии функционального гена in vivo, чем коммерческие препараты, и перспективными для эффективной адресной доставки генов.

Загрузки

Опубликован

2017-06-07

Выпуск

Раздел

Оригинальные исследования

Как цитировать

[1]
2017. Перенос in vivo β-галактозидазы с помощью амфифильных и комбинированных липосом. Патологическая физиология и экспериментальная терапия. 61, 3 (Jun. 2017), 4–9. DOI:https://doi.org/10.25557/0031-2991.2017.03.4-9.

Наиболее читаемые статьи этого автора (авторов)